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      山東農業大學趙鵬教授:雞傳染性貧血的危害及其防控

      發布時間:2023-08-10 11:40    作者:.    來源:信得科技    查看:
          在信得第四屆中國祖代種禽及大型父母代企業技術研討會上, 山東農業大學動物科技學院趙鵬教授以《雞傳染性貧血的危害及其防控》為主題,向與會行業同仁分享了雞傳染性貧血的危害和防控要點,以下是趙鵬老師的現場分享:
          今天我主要從“雞傳染性貧血病毒的流行與致病性”、“雞傳染性貧血病毒共感染的危害”以及“雞傳染性貧血的防控要點與新措施”三個方面向大家分享《雞傳染性貧血的危害及其防控》。

          一、雞傳染性貧血病毒流行與致病性

          傳貧作為典型的雞免疫抑制病、垂直傳播性疾病,既可以水平傳播,也可以垂直傳播,還可以通過疫苗污染傳播。無論垂直傳播還是水平傳播,傳貧的危害都比較嚴重。我們在通過雞胚接種的方式模擬傳貧垂直傳播的五次實驗中都發現,有垂直傳播的多數SPF雞群養不到一周便會死掉。此外,一些沒有傳貧母源抗體或母源抗體很低的雞,傳貧的水平傳播危害同樣很大。
          傳貧發現的歷史與疫苗污染也密切相關,它是一種典型的因疫苗污染而被發現的病毒。日本報道給雞進行疫苗免疫后SPF雞出現了貧血,由此發現了一個新的病毒,即我們現在說的雞傳染性貧血病毒,此后,在我們國內也發現和報道了活疫苗中的傳貧污染。

          傳貧之所以能夠流行如此廣泛,與它超強的傳播能力密不可分的。一些科研專家在動物房中的老鼠、貓、狗等動物的糞便里檢測到的傳貧病毒全基因組與雞群中的病毒完全一致,這說明傳貧的基因組非常穩定保守。很多人說,傳貧病毒進來容易送走難,它的傳播能力和生存能力超強,這就導致傳貧非常難防。

          毫無疑問,傳貧在臨床上最典型的器官損傷是胸腺萎縮和骨髓黃染。胸腺萎縮,嚴重時感染雞的胸腺發育指數大概是正常雞的的1/4或1/3的水平,如果經垂直傳播感染胸腺萎縮會更加嚴重,可能導致雞群整個免疫系統的嚴重損傷甚至崩潰,以致后期各種疫苗免疫效果都不理想。
          我們成功通過反向遺傳技術人工構建了山東2015年傳貧強毒株SD15株的感染性克隆,這株感染性克隆攻毒后的SPF雞紅細胞壓積大約是20或19,一般認為紅細胞壓積低于27時就屬于貧血,那么19-20就應該屬于貧血比較嚴重了。

          近三年,我們也在某痘病毒活疫苗中鑒定到傳貧病毒的污染,我們也成功地構建出了這個病毒的反向遺傳系統,證實這個毒株具有超強的致病性。在免疫了這個疫苗后,整個雞群在21天左右出現了嚴重的貧血,雞群的生產性能極差,紅細胞壓積大概在17左右。由此可見,如果疫苗有傳貧病毒的污染,疫苗使用效果將被極大抑制。而且,傳貧對機體的免疫抑制非常嚴重,一旦感染傳貧,雞群整個先天免疫水平都會處于很低水平,各種免疫器官萎縮或損傷,影響雞群健康。

          近年來,傳貧流行非常嚴重,比如有報道顯示,從全國17個省份,193個雞場的調研中發現,某區域的傳貧陽性率較高,甚至達到80%左右。很多雞群中雛雞傳貧病原的陽性率也在逐步提高,而且雞群的傳貧母源抗體不足并具有傳貧垂直傳播增加的傾向。
          二、雞傳染性貧血病毒共感染的危害

          不同雞免疫抑制病毒與雞傳染性貧血病毒共感染可能會增強其危害,所以我們要特別關注和提防。

          1.傳貧和雞馬立克病共感染對雞的影響

          ①對細胞壓積的影響:通過實驗數據我們看到,正常雞紅細胞壓積HCT值為29,符合國際普遍27以上的正常標準,傳貧單獨感染組HCT值是15,但是當傳貧和馬立克兩個共染之后雞的紅細胞壓積是8.9,只有正常雞1/4 左右的水平。我們都知道,紅細胞不僅能運輸氧還有很強的免疫功能,紅細胞壓積這么低,雞的免疫機能也會受影響。雖然雞到了21日齡有所緩和,但這兩種病毒共感染相對于傳貧單感染或者雞馬立克單感染以及正常的雞依然有很大差別。雖然28日齡、35日齡時有所恢復,但仍無法恢復到正常雞的水平,這就是共感染對紅細胞壓積也就是貧血的不良影響。
          ②對生長性能的影響。傳貧和雞馬立克兩種病毒單感染對生產性能有一定的影響,但兩種病毒共感染之后影響更大。比如到35日齡時,共感染組雞相對于正常雞平均體重相差了約70克,與單感染組相比體重相差了約20克,所以共感染對生產性能的影響非常明顯。
          ③對疫苗免疫后抗體的影響。我們評估了傳貧感染對四種疫苗免疫的影響,包括新城疫滅活苗,禽流感的 H5和H9以及傳染性法氏囊疫苗,毫無疑問共感染組與對照組有顯著性差異。對新城疫來講,正常的雞是7.32,共感染組是4.45。對H5亞型禽流感疫苗來講,正常的雞是7,共感染組是3.8;H9亞型禽流感疫苗正常雞是6,共感染組是3;法氏囊疫苗正常雞滴度是2441,共感染組是996。共感染的危害不僅與正常雞相比差異顯著,與單獨感染一種病毒的雞相比,共感染的危害也很明顯。
          傳貧為什么會導致馬立克疫苗免疫失???它對雞馬立克疫苗免疫有哪些影響?在沒有傳貧存在的情況下,比如在一次實驗中,CVI 988疫苗能夠對強毒攻毒提供95%的保護,但一旦有了傳貧,它的保護率就降到了54%。另外,傳貧還會影響疫苗免疫后雞的生長性能,免疫CVI988后有傳貧病毒的雞比沒有傳貧病毒的雞體重大概差了30克。此外,傳貧還影響免疫器官的發育,以胸腺為例,兩個組都免CVI 988,但一個組攜帶傳貧,一個組不攜帶傳貧,實驗證明,攻毒9天后攜帶傳貧的SPF雞胸腺發育指數是0.17,不攜帶傳貧的胸腺發育指數是0.39,發育指數值越小說明胸腺萎縮越嚴重。16天時這種差別更大,攜帶傳貧的胸腺發育指數是0.12,不攜帶傳貧的胸腺發育指數是0.50,也就是說攜帶傳貧病毒感染的雞胸腺萎縮到正常雞約1/4的水平。
          2.J亞群禽白血病和傳貧共感染對雞的影響

          ①對生長性能的影響。根據已有的報道和我們的最近研究進展,J亞群禽白血病和傳貧共感染對雞的危害很大。從生長性能來講,兩個病毒共感染后,體重最低的永遠是共感染組,體重大概比正常雞下降30%左右。另外,從7天到63天,監測各種臟器的病毒復制情況來看,當這兩個病毒共感染時,一種病毒會促進另一種病毒在免疫器官和臟器中的顯著復制。
          ②對疫苗免疫的抑制和禽白血病凈化的影響。這兩種病毒的混合感染會增強對疫苗免疫的抑制作用。此外,我們通過雞胚共感染白血病和傳貧的模擬實驗中證實,共感染后死胚率最高,這就可以解釋為什么我們做凈化后可以顯著提高雞的孵化率,而攜帶傳貧病毒它的孵化率就很難提高。

          ③對病毒血癥的檢測和胎糞p27檢測的影響。我們檢測發現,傳貧跟白血病共感染之后,雞仍然是100%的病毒血癥,但對胎糞p27陽性率來講有一點變化,沒有像血液做病毒分離一樣有規律。

          ④傳貧和白血病通過雞胚共同垂直傳播后對下一代的影響。實驗研究發現前兩周對整個免疫器官會產生損傷,毫無疑問共感染對脾臟、法氏囊都有一定影響。另外,這兩個病毒通過雞胚垂直傳播之后,也會幫助另一個病毒在機體內顯著增強復制。
          3.傳貧和腺病毒共感染對雞的影響

          2016 年我國出現安卡拉病后,我戲稱傳貧和腺病毒是咖啡和伴侶,它們離了誰都不香。比如,我們率先從某新城疫活疫苗中檢出傳貧和腺病毒的混合污染,花了很大的力氣把這兩個病毒純化出來,進行重復模擬實驗。最后我們發現,單獨污染腺病毒的疫苗使用后并沒有像臨床上80%那樣的死亡率,但同樣的腺病毒和同樣的劑量,加上傳貧混合污染后的疫苗再使用,就出現了高達75%的死亡率,非常切合當時臨床實際情況。
          三、雞傳染性貧血防控要點與新措施

          傳貧防控的要點——抗體是全世界的共識。幾十年來我們通過兩種途徑來解決抗體的問題,第一是疫苗免疫,第二是自然感染。在很長時間內沒有商品化疫苗免疫的情況下,很多企業都是靠自然感染誘導獲得抗體。作為一個環境感染壓力很高的病毒,傳貧在養殖環境中無處不在,要想使它徹底凈化,我認為現在的條件下難度很大、凈化成本非常高,性價比非常低,暫時還沒到那個階段。

          我們通常通過免疫或自然感染誘導后,再監測種源的傳貧抗體滴度、整齊度、離散度,以及監測下一代雛雞的母源抗體滴度、整齊度、離散度。我們希望抗體滴度越高越好,離散度越低越好。無論用什么方式實現了這個目標,臨床上一般不會出現傳貧的問題。所以傳貧防控的核心一直是讓雞獲得足夠的高質量的母源抗體,以此擋住傳貧的早期感染,如果能擋住早期感染,即使大日齡的雞再感染也會很容易產生傳貧抗體,不容易形成持續性帶毒或者垂直傳播,從而又容易產生新的抗體,形成新一輪的抗體循環。我們希望母源抗體能在傳貧最易感的時期保護雞群免于感染,以避免長期持續帶毒及形成垂直傳播的可能性。對于傳貧,無論是疫苗免疫還是自然感染誘導,我們希望抗體升上去后在整個產蛋期保持非常平穩的狀態。
          我國目前沒有注冊的商品化國產疫苗,傳貧疫苗研制的難點有很多方面,一是我們沒有解決好病毒培養體系的問題,二是傳貧病毒非常穩定,它不像其他病毒一樣隨著傳代增加而使毒性很快減弱,需要我們強化基礎研究加以解決。我們在進行信得轉移因子-信必妥對傳貧的抑制實驗中發現,信得轉移因子對抗傳貧有一定效果,下面簡要介紹一下實驗結果。

          拋開抑制病毒感染而言,信得轉移因子對生長性能也有促進作用。實驗中我們發現,使用了高劑量信得轉移因子的實驗組雞群,即便有傳貧感染體重仍然能夠接近正常SPF雞的水平。
          信得轉移因子之所以能抗病毒,一個重要因素是因為它能夠刺激先天抗病毒因素得到有效釋放。我們的研究證實,相對于不使用轉移因子的SPF雞,SPF雞使用轉移因子后干擾素、白介素、腫瘤壞死因子等均出現了上調,由此說明,信必妥能夠刺激抗病毒先天免疫因素得到有效釋放,特別是用了高劑量的轉移因子后干擾素呈現了高表達。
          對于可以抗抑制多種病毒的廣譜抗病毒蛋白MX蛋白,我們發現使用了信必妥后MX蛋白相對表達水平上調了3倍,我們原來做過的各種免疫增強劑都沒能達到這種效果。以前我們的實驗數據也表明,一旦 MX蛋白表達后,對戊肝病毒等也有很強的抑制作用。
          信得轉移因子對雞的細胞免疫也有明顯促進作用,比如我們觀察到信必妥對代表細胞免疫水平的CD4/CD8比值有明顯的增加作用,表明促進了細胞免疫水平,而且與香菇多糖聯合使用后效果更好。另外,我們觀察了轉移因子對多種器官發育的影響,包括法氏囊、肝臟、脾臟、胸腺等。我們知道傳貧感染后很嚴重的危害就是導致胸腺萎縮,通過對比發現,使用高劑量的轉移因子后,即使感染了傳貧強毒,雞群胸腺的發育基本仍接近于了空白組的水平。
          轉移因子對緩解傳貧感染的作用非常明顯。實驗表明,感染傳貧的雞經高劑量轉移因子抑制后和正常的雞紅細胞壓積幾乎沒有差別,不僅如此,它還能夠抑制傳貧在體內的復制。不僅在血液里邊,在肝臟、胸腺中信必妥對傳貧的復制也有顯著的抑制作用??梢哉f,不管是低日齡還是高日齡,高劑量的轉移因子對傳貧都有非常明顯的抑制作用。

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